80℃保存机采浓缩血小板的研究

内容摘要: 作者:邓为彬吴鸣黄莺陆燕 作者:邓为彬吴鸣黄莺陆燕目的 明确血小板冰冻保存前后血小板参数的变化,并为临床急需应用冰冻血小板的治疗及抢救提供理论依据和实验数据。方法 采集健康人新鲜血进行离心,制作富含血小板的血浆(PRP),采用全自动血细胞分析仪检测并比较冰冻保存前后血小板数量PLT、PCT,MPV,P-LCR,PDW,PH试纸测PH值;将分离的血小板分别加入保护剂二甲基亚砜(5%DMSO)后迅速置于-80℃低温冰箱保存。1月后对血小板进行复苏,再次检测Plt、MPV、PDW、PCT、P-LCR、PH值。然后对冰冻前后指标进行配对资料t检验。结果 Plt、MPV、PDW、PCT、P-LCR、PH值冰冻前后对比均无统计学意义(P>0.05)。结论 血小板在-80℃条件下冰冻保存1月,血小板相关参数保持稳定。 冰冻保存 二甲基亚砜 血小板参数随着输血医学的不断发
内容摘要:作者:吴晓燕李巧玉葛峰肖少春刘小雯何锐洪李兆兰冯志广

作者:吴晓燕李巧玉葛峰肖少春刘小雯何锐洪李兆兰冯志广

二甲基亚枫

目的探讨-80℃冰冻保存机采浓缩血小板的功能及止血效果。方法随机抽取冰冻保存3个月之内,3~6个月之间,6~9个月之间的冰冻血小板样品于42℃解冻后进行相关实验,比较不同保存时期冰冻血小板的功能及回收率;分血液病组和非血液病组观察患者输注冰冻血小板24h后出血症状的控制及校正血小板增高指数CCI值。结果冻存3个月内,3~6个月的两组冰冻血小板的粘附功能、聚集功能与新鲜机采血小板相比差异均无显著性(P>0.05);而冻存6~9个月的冰冻血小板的粘附功能与新鲜机采血小板相比则差异有非常显著性(P<0.01)。三组冰冻血小板的第Ⅲ因子活性测定与正常对照相比,均在正常范围;平均回收率为85.2%。两组患者在输注冰冻血小板24h后能有效控制出血症状的比率平均为93.3%;而CCI值≥10000/μl的比率,非血液病组显著高于血液病组。结论5%DMSO-80℃冰冻保存半年以内的机采浓缩血小板具有良好的止血功能。

关键词-80℃二甲基亚枫保存机采血小板

血小板输注是治疗各种血小板减少或功能障碍导致出血的重要手段。由全自动细胞分离机制备的浓缩血小板,因其纯度高、疗效显著、白细胞污染少,同种免疫发生率低等优点,更为临床广泛应用[1,2]。然而,血小板在22℃恒温条件下,用振荡或旋转式保存的时间仅5天;同时,其保存的温湿度条件也正是细菌繁殖的最适条件,因此易发生污染而导致严重的输注事故发生。目前,许多中小血站采用即采即供的方式提供机采血小板,而其整个采集程序从预约献血员、体检、二次检验到机器采集通常需要6~8h,难以满足临床突发性大出血的抢救而延误治疗时机。为此,笔者从1998年6月开始尝试国际普遍使用的生物冷冻保护剂二甲基亚枫(DMSO)对机采浓缩血小板进行深低温(-80℃)保存[3],并对解冻后的血小板进行了一系列的功能检测和临床疗效的观察,现将研究结果报告如下。

1材料和方法

1.1主要仪器设备CS-3000PLUS血细胞分离机;F-820血细胞计数仪;TYXN-91A智能血液凝集仪;局部100级净化间;-80℃深低温冰箱。

1.2冰冻血小板的制备、保存与解冻选择符合国家规定体检标准的献血员,依照CS-3000PLUS血细胞分离机中程序1即血小板采集程序,设置全血流速为50ml/min,ACD/全血比率为1:11,界面探测值(IDO值)为6~8,血小板终产量均≥3.0×1011,容量为200ml。产品在100级净化间内,缓慢加入生物冷冻保护剂二甲基亚枫(DMSO)至终浓度为(5.0±0.5)%,水平置-80℃冰箱保存,每袋产品同时留样4~5ml一并冻存。用时取出制品42℃解冻后立即输注给患者。

1.3实验方法随机抽取冰冻保存3个月之内,3~6个月之间,6~9个月之间的冰冻血小板样品于42℃解冻后进行以下实验:滴定法测定产品中DMSO含量;蝰蛇毒法测定血小板第Ⅲ因子活性;玻珠柱法测定血小板粘附功能;以花生四烯酸为诱导剂测定血小板聚集功能。同时还随机选择36例新鲜机采浓缩血小板进行以上实验,以实现在相同实验条件下与冰冻血小板之间的对比与分析。

1.4临床资料来源本文所观察的受者,均为本市各医院的患者,都有明确输注血小板的适应证,有肝、肾功能损害的患者禁用。我站在向临床提供冰冻血小板的同时发出“冰冻血小板临床输注观察表”,内容包括患者的一般情况、临床诊断,输前患者的症状、体征、血小板计数,输注后患者症状、体征的改善情况及血小板计数等,由主管医生填写后反馈给我站。

1.5临床疗效观察指标将输注冰冻血小板的病人,分为血液病组和非血液病组分别观察。凡符合下列两项指标中的一项视为有效:(1)输注冰冻血小板24h,临床出血情况得到明显控制;(2)输注冰冻血小板24h,校正血小板增高指数CCI值≥10000/μl。

内容摘要:作者:杨惠云 田玮 郭颖 张瑞丽 张王刚 作者:杨惠云 田玮 郭颖 张瑞丽 张王刚   本研究研制新型的血小板冷冻保存液,观察血小板在不同保存液冻存前、后的形态改变,以及体外受凝血酶作用下的活化状态,同时比较添加UDP?Gal对保存液保存效果的影响。在以往单一应用较高浓度的DMSO为血小板低温保存液的基础上,自行研制新型保存液:2%DMSO+thrombosol+UDP?Gal,在不同时间分别观察血小板形态及测定血小板膜表面糖蛋白CD62P的表达。结果显示,在圆形、树突形、不规则形态的百分比方面冷冻保存对血小板形态有显著影响,2%DMSO+thrombosol组和2%DMSO+thrombosol+UDP?Gal组保护作用优于5%DMSO组;与新鲜血小板相比,冻存后血小板表达CD62P明显下降,保存1月与3月时CD62P表达无明显差异,3种保存液组之间
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